高压破菌系统

高压破菌系统慧聪教育网蛋白质在大肠杆菌中高水平的表达，常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。不单是外源真核蛋白在大肠杆菌中表达时会遇到这种情况，大肠杆菌自身可溶的蛋白过量表达时也会出现包涵体的情况。包涵体产生一般认为是蛋白的不正确折叠造成的。聚能生物的-实验室超高压均质机，破碎大肠杆菌效果显著，在处理包涵体方面具有相当的经验。关于包涵体的处理一般包括这么几步：菌体的破碎（裂解包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化。下面重点介绍一下菌体的破碎。一、菌体的裂解可以采用高速组织捣碎:此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。二、玻璃匀浆器匀浆：此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。三、超声波处理法：用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。此法多适用于微生物材料，用大肠杆菌制备各种酶。此法的缺点是在处理过程会产生大量的热。对超声波及热敏感的蛋白和核酸应慎用。四、反复冻融法：将细。

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高压破菌系统各位虫友，我在实验中遇到一个比较棘手的问题，应用超声破碎法破碎一株革兰氏阳性菌的效果非常差，只有相同条件下（次,）处理大肠杆菌的三分之一的效果。实验的目的是测定、等酶的酶活，因此既要顾及酶活性，又要追求高破碎效率。有在这方面进行过尝试的虫友帮帮忙。啊举报删除此信息站内联系实验室中如果样品不是太多的话，可以试试研磨的方法。超声的话你可以稍微优化一下，不知道你的超声条件有依据么。站内联系加一点溶葡萄球菌素（酶）。站内联系液氮研磨的方法也可以试试。站内联系可以用均质器进行高压破菌，不过样品需要较多站内联系先加溶菌酶度水浴十分钟，再破壁效果会好些，溶菌酶终浓度站内联系常用的方法是用溶菌酶水解细胞壁的（适当延长消化时间）,溶菌酶可以专一性地作用于肽聚糖分子的-乙酰胞壁酸与乙酰葡萄糖氨之间的β糖苷链使之断裂，使细菌细胞壁变得松驰如果实在很难破壁的话可以试试先用溶菌酶处理再超声破碎细胞提取蛋白。孤行客站内联系。

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高压破菌系统我用高压仪破碎，破碎后总有很多泡沫，与平行进行的超声破碎对比效果发现两者破碎后得到的上清，在跑胶时高压后上清的条带都明显较暗，即整个泳道内各条带与超声相比都变暗了。问过别人，他们高压破酵母，时泡沫也不少，讨论后认为泡沫中可能有不少蛋白，故考虑除泡，想请教各位，用什么纯除泡效果比较好又不影响后面纯化的进行，先谢了。高压匀浆破菌？我做个几个表达蛋白的比较，高压和超声，电泳没有任何区别。高压匀浆发热量很大，破菌前菌体悬浮液要预冷的，高压出口容器要冰水浴。我做高压时没有很明显的泡沫，只是粘度比较大，超声一下好了。你的泡沫多也许与破菌缓冲液有关。:高压匀浆破菌？我做个几个表达蛋白的比较，高压和超声，电泳没有任何区别。高压匀浆发热量很大，破菌前菌体悬浮液要预冷的，高压出口容器要冰水浴。我做高压时没有很明显的泡沫，只是粘度比较大，超声一下好了。你的泡沫多也许与破菌缓冲液有关。是高压匀浆破碎，使用前预冷了的，但。